La provincia incluye en su territorio dos de las primeras villas cubanas, fundadas por los colonizadores españoles en el año 1514: Sancti Spíritus y Trinidad. Cuenta además con el lago artificial de agua más grande del país, la presa Zaza, que con sus más de mil millones de metros cúbicos de agua constituye una excelente plaza para la pesca deportiva fundamentalmente de la trucha, cuyos tamaños las señalan como las mejores de su especie a nivel internacional.

Sancti Spíritus, capital de la provincia, fue fundada en 1514 casi en el centro de la Isla y sirvió de punto de partida para la conquista de Yucatán. La ciudad conserva un centro histórico con edificaciones de los siglos XVIII y XIX, entre los que se destaca la Parroquial Mayor, construida en 1680.

Trinidad, conocida también como la Ciudad Museo de Cuba es una de las localidades coloniales más bellas de la Isla, fundada en 1514 bajo el nombre de Villa de la Santísima Trinidad, y recibió la condición de Patrimonio de la Humanidad por la UNESCO al ser considerada uno de los conjuntos arquitectónicos más completos del continente americano. Trinidad combina características de los siglos XVIII y XIX y los primeros años del XX, por lo cual los recorridos por sus empedradas calles llevan a los visitantes a descubrir sus artísticos balcones, obras de herrería admirablemente trabajados, escalinatas y fachadas multicolores de los edificios, cada uno un museo en sí mismo.

Son inigualables a Plaza Mayor, desde donde se cree haber viajado en el tiempo, o la iglesia de la Santísima Trinidad, considerada una de las más amplias del país y que atesora valiosas piezas del erario artístico religioso de Cuba, entre ellos el famoso Cristo de la Vera Cruz, así como un altar de mármol dedicado al culto de la Virgen de la Misericordia -único de su género en la Isla-, y otras imágenes religiosas de gran valor; las ofertas culturales se completan con las muestras de los museos Romántico -instalado en el antiguo Palacio de Brunet- y de Arqueología "Guamuhaya", exponente de la cultura aborigen de la isla.

Cercano a la ciudad está el Valle de San Luis o Valle de los Ingenios, museo de la industria azucarera cubana con 75 ruinas correspondientes a ingenios, casas de verano, barracones y otras instalaciones relacionadas con la fabricación del dulce producto. Completa la oferta el detalle de la famosa torre de Manaca-Iznaga, edificada en 1816 y que con sus 45 metros de altura marcaba con su campana el inicio y fin de los trabajos en las plantaciones de la caña de azúcar. La zona incluye además el paisaje natural protegido "Topes de Collantes", en el macizo montañoso del Escambray, con cerca de 12 mil 500 hectáreas de extensión y numerosas especies endémicas de la flora y la fauna, donde el clima de abundantes precipitaciones favorece el hábitat de orquídeas, musgos, líquenes, helechos arborescentes, pinos y eucaliptos.